二次抗体

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什么是二抗体?

二抗是结合一抗或抗体片段(如Fc或Fab区域)的多克隆或单克隆抗体。它们是通过用来自不同物种的抗体免疫宿主动物而产生的。山羊、驴、绵羊、鸡和兔子是最常用的宿主物种，虽然也有其他可用的宿主。

一抗和二抗的区别是什么?

这是实验室里新手经常问的问题。别担心，一个来自CUSABIO的好人写了一篇关于这个问题的文章，题为一抗与二抗的区别”。在这篇文章中，作者从五个角度回答了这个问题:结合能力、使用和标记、来源、克隆性和预吸附。

如何选择二抗?

对于二抗，除了常见的一抗和二抗的区别问题，如何选择合适的二抗你的实验才是终极问题。想要解决这个问题，需要考虑以下几个方面:

• 宿主种的一抗

  这是我们寻找合适的二抗的第一步。这也应该是每个人最熟悉的原则:第一抗体应该来自哪种物种，第二抗体应该抵抗哪种物种。

• 一抗类或亚类:

  不同类型抗体的轻链可分为kappa (κ)型和λ (λ)型，重链的结构决定了每种抗体的类别。严格来说，二抗需要与一抗类型相匹配。关于这一点，您可以查看名为什么是一抗的类(isotype)和/或子类的问题，以获得更多的信息。

• 二次抗体特异性

  对整个抗体分子(H+L)具有特异性:如抗igg (H+L)，这种抗体能与抗体的各种结构成分结合，并能与其他免疫球蛋白(IgM或IgA)发生反应。因为所有的免疫球蛋白都有相同的轻链(κ或λ)。

  特异性Fab片段:这种抗体既能与重链结合，也能与轻链结合，因为它们能与轻链发生反应，所以也能与同样轻链的其他免疫球蛋白结合。

  特异性Fc片段或重链:这些抗体与重链的Fc区域发生反应，因此，它们是类特异性的。例如，γ链特异性抗体只与IgG反应，而μ链特异性抗体只与IgM反应。

  专为轻链:反应与所有类别的抗体。

• 二抗偶联标签

  一般来说，二抗可以是酶标记(辣根过氧化物酶HRP和碱性磷酸酶AP或其衍生物apap, PAP)，荧光标记(FITC, Alexa-Fluor, Qdot)或生物素偶联。标签选择的第二抗体主要取决于具体的实验。

引用

山羊抗兔IgG(H+L)抗体;合共轭参考文献“设计一个二阶DNA逻辑门控纳米机器人，在活细胞膜上感知然后释放，用于多路诊断和协同治疗”。Angewandte Chiie-International Edition, 2021年

兔抗人IgG抗体;HRP偶联乳腺癌治疗影响抗新生儿Nav1的表达。乳腺癌患者血清中的5种抗体"肿瘤学字母,2020

山羊抗兔IgG(H+L)抗体;酶标参考文献“抗恢复抗体提示系统性红斑狼疮眼底异常”。红斑狼疮,2020

兔抗人IgG Fc抗体;HRP偶联参考文献“玻尿酸-endostatin2-alft1 (HA-ES2-AF)纳米样偶联物靶向治疗疾病”。控制释放学报，2018

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