跨膜蛋白(trans - membrane protein, TP)又称完整蛋白,是存在于整个生物膜中的一种膜蛋白。跨膜蛋白在分子转运、信号转导、能量利用等基本生理过程中起着重要作用。一方面,它们可以向细胞发送外部环境包含的信息。另一方面,它们是细胞收集外部环境信息的一种途径。
基因组序列中近30%的基因编码跨膜蛋白,其中50%是目前已知药物的靶标。然而,跨膜蛋白的表达和纯化非常困难。CUSABIO将帮助您克服困难。
●多种膜蛋白表达技术平台。
类病毒颗粒(VLPs)是由多种病毒的一个或多个衣壳蛋白自动组装而成的纳米级颗粒。VLPs不含病毒核酸,不能自主复制,安全性高,整体结构与病毒颗粒相似。
洗涤剂是双极性分子,可分解脂膜释放膜蛋白,并为溶液中处于脱膜状态的膜蛋白提供疏水环境,维持膜蛋白的疏水跨膜结构。利用这一特性解决了TPs表达的自然构象问题。
一些对洗涤剂敏感的TPs不适合用于含有洗涤剂的缓冲液,这些缓冲液的特点是不能纯化、容易降解和不活性。对于这种类型的膜蛋白,我们建议尝试纳米盘技术。
CUSABIO作为一家经验丰富的蛋白质制造商,提供了上述三种技术平台来推动跨膜蛋白的发展。自该平台建立以来,已成功生产了200个蛋白,产量为mg/ml,其中包含99个具有1-15个跨膜结构域的跨膜蛋白(TPs)和传统大肠杆菌表达系统难以表达的毒性蛋白。我们还生产了含有多个跨膜结构域的高分子量蛋白质(130 kDa -140 kDa)。
近200种全长膜蛋白已成功开发。
CLDN18.2
(4次)
CD20
(4次)
ACKR1
(7次)
ADIPOR1
(7次)
RHD
(11次)
SLC7A11
(12次)
●高纯度SDS-PAGE检测。
的纯度HTR1B (CSB-CF010882HUb2)(7次)5%富集凝胶、15%分离凝胶的SDS-PAGE检测结果大于90%。
的纯度CLCN3 (CSB-CF005482HU(A4)(15次)5%富集凝胶和15%分离凝胶的SDS-PAGE检测结果大于85%。
高特异性通过Western blot (WB)验证。
CLDN18.2 (CSB-MP005498HU(A5))(4次)小鼠抗6*His单克隆抗体检测。三个条带分别对应单体,同二聚体,同三聚体。
CD20 (CSB-MP015007HU)(4次)小鼠抗6*His单克隆抗体检测。
●经功能酶联免疫吸附试验验证具有良好的生物活性。
固定化ABCD1 (CSB-CF001068HU)(5次)在5 μg/ml时可与人结合PEX19,电子商务50人体PEX19的浓度为22.96 ~ 33.00 μg/ml。
固定化ACKR1 (CSB-CF624105HU)(7倍)在1 μg/ml时能结合人CCL2, EC50人CCL2蛋白的浓度为48.64 ~ 60.24 μg/ml。
通过SEM验证结构正确。
的vlp样结构CLDN18.2 (CSB-MP005498HU(A5))(4次)已被瞬变电磁术证实
的vlp样结构CD20 (CSB-MP015007HU)(4次)已被瞬变电磁术证实
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跨膜蛋白位于细胞与外界的交界面,介导细胞与外界的信号转导,执行许多重要的细胞生物学功能。例如,它是各种信号分子、激素和其他底物的受体;它参与细胞膜内外物质、能量和信号的交换;它构成各种离子跨膜通道,将营养物质和一些无机电解质输入细胞,并将有毒或无用的代谢物排出细胞。
离子通道
G protein-Coupled受体
磷酸腺苷磁带
人类白细胞抗原
通过无细胞表达系统表达的跨膜蛋白产物可用于研究跨膜蛋白的功能。将跨膜蛋白整合到囊泡中进行结构和功能研究是膜蛋白研究的热点。
跨膜蛋白按其结构可分为α -螺旋蛋白和β -桶膜蛋白。详情请参阅文章:跨膜蛋白的简历.