你生物学研究的好伙伴
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问:你们提供什么产品或服务?
CUSABIO提供70本机的蛋白质, 100年小分子抗原, 320 +活性蛋白质， 1000+重组蛋白储备，5700+已开发的重组蛋白，36000 +跨膜蛋白, 500000 + semi-customized重组蛋白，也可以提供无风险蛋白表达服务．
问:我们为什么选择你们的蛋白质?
CUSABIO为数百万个不同物种、不同规模、不同表达系统的高纯度重组蛋白提供“无风险”定制服务。
我们已经建立了5个重组表达系统从原核(大肠杆菌)到真核(酵母、哺乳动物细胞和昆虫杆状病毒)，也建立了独特的在体外大肠杆菌表达系统，使我们能够表达通常很难表达的跨膜蛋白。此外，CUSABIO蛋白QC部门拥有专业的技术团队，配备先进的实验仪器，确保每一种蛋白都有完整的COA报告和高质量。SDS-PAGE检测CUSABIO蛋白纯度超过85%。
问:我在哪里可以找到使用过你的蛋白质的其他研究人员的参考资料?
我们的官方网站更新了研究人员使用CUSABIO蛋白后发表结果的文章。请按此浏览更多资料://www.gilabchnm.com/m-248.html．
问:重组蛋白的应用是什么?
重组蛋白在医学、基础研究和生物技术等领域有着广泛的应用。你可以从这个链接了解更多://www.gilabchnm.com/c-20272.html．
问:我们应该按照优先顺序选择哪种表达系统?
我们有五个表达系统，包括大肠杆菌表达系统，在体外大肠杆菌表达系统、酵母表达系统、昆虫杆状病毒表达系统、哺乳动物表达系统。它们在翻译后的修改中是不同的，选择取决于你的实验目的。大肠杆菌表达系统研究广泛，价格低廉，是免疫相关实验、受体与配体结合实验、细胞实验或药物筛选实验的正确选择，酶活性实验参考各相关物种。点击这里了解更多关于CUSABIO的五种表达系统。
问:你们对这种蛋白质进行了哪些验证?
通常我们会提供分子量、电泳结果(SDS-PAGE)、浓度、纯度等。如果您有特殊需求，我们还可以提供电泳参数，活性评估，序列鉴定，标签去除服务，内毒素去除服务，WB和MS验证。你可以从这个链接了解更多://www.gilabchnm.com/QC_protein.html．
问:你的蛋白质的浓度范围是什么?你如何确定它们的数量?
每个批次的蛋白浓度不会完全相同，但我们可以保证我们的表达系统浓度为0.1-5.0 mg/mL。如果您对蛋白质浓度有特殊要求，请提前与我们沟通。
蛋白浓度检测有bradford法、BCA法、A280法三种方法，三种方法均有干扰缓冲成分。根据缓冲液的组成，bradford法是包括我们在内的实验室最常用的方法，浓度检测范围为0.1-5 mg/mL。有时，我们也使用BCA方法。
问:每种蛋白质的纯度是多少?
SDS-PAGE检测纯度大于85%。
问:每一种蛋白都做过活性测试吗?
我们所有的蛋白质都是在温和的条件下提纯的。如果我们提供的蛋白质是成熟蛋白质的全长，那么理论上它应该是有活性的。由于活动不能100%保证，我们建议客户购买小尺寸先做验证。如果他们验证后蛋白质是活性的，他们以后可以购买更大的尺寸，我们将为他们重新订购提供一定的折扣。我们也有一些已经验证过活性的蛋白质，我们在网站上列出了它们的生物活性数据。点击这里了解更多有关相应蛋白质的细节。
你们的产品有什么规格?
可提供5 μg、10 μg、20 μg、50 μg、100 μg、500 μg、1 mg等不同大小的蛋白质。此外，我们有良好的能力和经验的大规模表达(10 mg, 50 mg, 100 mg, 200 mg, 500 mg等)。
问:你们使用什么类型的标签进行融合?
我们提供的常用标签有His-tag, FLAG-tag, GST-tag, MBP-tag，组合标签(His-GST-tag, His-sumo-tag, His-MBP-tag)等。有时，蛋白质的标签会在制造过程中被确定。如果您有指定的标签类型，请随时与我们咨询。点击这里了解更多关于不同标签的一般信息。
问:标签的序列是什么?
每个标签的顺序不同。详情请与我们联系。
问:重组蛋白的分子量是多少?
融合蛋白的理论分子量=标记的分子量+目标蛋白的分子量。您可以使用库萨比奥分子量计算器计算理论值或参考数据表和COA出货。
问:给定的标签类型和蛋白质的任何潜在生物活性有什么影响?
理论上小标签通常对蛋白质活性的影响很小。但具体对蛋白质活性的影响还不能下结论(对某些蛋白质没有影响，对某些蛋白质影响较小，对某些蛋白质影响较大)。
问:你能去掉标签吗?
并不是所有的蛋白质标签都能被去除，因为有些蛋白质在去除标签后会变得非常不稳定。
如果需要拆除标签，请提前与我们沟通，需要2-3个工作日。如果我们成功移除标签，我们将收取额外的移除标签费用。如果我们无法移除标签，我们将不收取任何额外的费用，并在数据表中备注此信息如下:“注意:实验室确定您的蛋白质上的标签无法用标准实验室程序移除。蛋白质的标签是完整的。”
问:你能去除内毒素吗?
并不是所有的内毒素都能被清除。如果需要拆除标签，请提前与我们沟通，需要2-3个工作日。采用PMB亲和层析法免费提供内毒素去除服务，采用LAL试剂半定量检测内毒素含量，保证内毒素水平在0.1 ng/μg (1 EU/μg)以内。
问:你们能提供无菌生产加工吗?
是的，我们可以提供这项服务，而且是免费的，但您应该在下单时备注这些信息。我们在冻干前对液体蛋白进行了无菌处理，但冻干过程中可能存在污染，所以不能说整个过程无菌。
问:能否为这种重组蛋白提供相应的抗体?
是的。我们可以为重组蛋白提供相应的抗体。在重组蛋白报价的基础上，加上一定的成本，我们将提供10-15 mg亲和纯化的多克隆抗体，并保证该重组蛋白的western blot和ELISA阳性。交货时间为蛋白质交货后2.5个月。如需了解更多详情，请随时与我们联系。
问:为什么我们的蛋白质产品在管道中几乎看不见?
CUSABIO蛋白产品不含载体蛋白或其他添加剂(如牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)和蔗糖)，由低盐溶液冻干而成，因此往往不形成白色网格结构，而是微量蛋白沉积在管内，形成薄的透明或不可见的蛋白层。
Tips:打开盖子前，建议先用小型离心机离心20-30秒，以确保里面的东西在试管底部。我们的质量控制步骤保证了每根试管中所含的蛋白质量是准确的，虽然有时候你看不到蛋白粉，但是试管中的蛋白质含量仍然是非常准确的。
问:如何确定细胞因子的物种交叉反应性?
a.除了少数例外，大多数人类细胞因子在小鼠细胞上是活跃的。
b.许多小鼠细胞因子也可能对人类细胞产生影响，但活性可能低于相应的人类细胞因子。
c.少数几种人类细胞因子作用于小鼠细胞时会比相应的小鼠细胞因子更活跃，如IL-7。
d.干扰素、GM-CSF、IL-3、IL-4等细胞因子具有物种特异性，在非同源细胞上几乎没有活性。
e.相比之下，成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor, FGF)和神经营养因子具有高度的保守性，对不同物种的细胞都有良好的活性。
问:什么是一般的防腐剂?你通常会加哪种防腐剂?
常用的防腐剂有Proclin 300、叠氮化钠等。我们的蛋白质中没有添加任何防腐剂。
问:一般的保护剂是什么?你们通常加什么样的保护剂?
常用的保护剂有糖类、多元醇、聚合物、表面活性剂、部分蛋白质和氨基酸等。我们通常添加8%(质量比体积)的海藻糖和甘露醇作为冻干保护剂。海藻糖能显著阻止冷冻干燥过程中蛋白质二级结构的改变、蛋白质的延伸和聚集;甘露醇也是一种通用的保护剂和填充剂，它可以减少某些蛋白质在冻干后的聚集。
问:什么是蛋白质表达和纯化?
蛋白质表达是产生特定蛋白质的生物技术过程。它可以在原核生物，真核生物或在体外大肠杆菌表达系统。蛋白质纯化是从细胞或生物体中分离出一种或几种蛋白质的一系列过程。最常用的蛋白质纯化方法是亲和层析法，它是由不同的蛋白质标签设计的。其他蛋白质纯化方法，包括离子交换色谱、尺寸排除色谱、抛光纯化和疏水相互作用色谱可用于处理无标记蛋白的高纯度。
问:为什么没有/低蛋白表达?
a.向量构造错误。您应该通过测序确认载体或申请我们的定制克隆服务。
b。稀有密码子。你应该优化密码子，使用补充稀有密码子的菌株，在较低的温度下诱导或在较差的培养基中生长。
c。蛋白质毒性。应该使用调控更严格或质粒拷贝数更低的启动子。在t7为基础的系统中使用含有pLysS/pLysE的菌株或更适合表达毒性蛋白的菌株。高OD启动诱导，缩短诱导时间。使用含有lacs启动子的表达载体时加入葡萄糖。
问:如何避免包涵体和提高可溶性表达?
a.具有高疏水性或跨膜结构域的蛋白质。你应该加融合标签或者加热休克伴侣。应在较低的温度下诱导较短的时间，或改用较差的介质。产生截断形式的蛋白质或使用膜丰富的菌株。
b.不正确的二硫键形成。你应该添加融合伙伴，包括硫氧还蛋白，DsbA, DsbC。克隆于含有分泌信号肽到细胞周质的载体。利用胞质氧化环境下的gamiB (DE3)菌株。降低诱导剂浓度和诱导温度。
c。不正确的折叠。你应该用一个融合搭档。与分子伴侣共表达。使用具有适应寒冷的伴侣的菌株。补充介质与化学伴侣和辅助因子。降低诱导剂浓度，加入新鲜培养基。低温诱导时间较短。
问:为什么蛋白质的分子量比预测的要小?
a.蛋白质序列中的稀有氨基酸硒半胱氨酸(Sec)或吡咯赖氨酸(Pyl)。你应该用其他的氨基酸来代替这两种不同寻常的氨基酸。
b.融合蛋白翻译过程不平衡。你应该更换另一个融合标签或将融合标签移到c端。应在较低的温度下诱导较短的时间，或改用较差的介质。
c。蛋白质降解。你应该替换特定的蛋白酶位点。使用蛋白酶缺乏菌株。诱导在高OD。在低温下诱导时间较短或破坏细胞时使用蛋白酶抑制剂。
问:为什么实际的波段大小与预测的不同?
翻译修饰。磷酸化，糖基化，等等，增加蛋白质的大小。
翻译后的乳沟。许多蛋白质以原蛋白的形式合成，然后裂解形成活性形式。
c。拼接变体。选择性剪接可以从同一基因中产生不同大小的蛋白质。
d。相对。氨基酸组成的相对电荷不同，会影响电泳迁移率。
e.多聚体，如蛋白质的二聚体。这通常在还原条件下被阻止，尽管强相互作用可以导致更高波段的出现。
f.蛋白质结构，如二硫键、蛋白质二级结构或蛋白质三维结构形成。
g.疏水蛋白，如跨膜蛋白，可能很难迁移到凝胶中，从而导致不同的多带模式。
问:如何表达具有生物活性的蛋白质?为什么蛋白质是不活跃的?
为了获得具有生物活性的蛋白质，你应该选择正确的表达系统，合适的表达载体，确定合适的纯化方法，并进行验证实验。你可以从这个链接了解更多://www.gilabchnm.com/c-20275.html．否则，你可以检查以下问题:
a.蛋白质溶解度低。你应该将想要的蛋白质融合到一个融合伙伴和较低的温度。
b.缺乏必要的翻译后修改。你应该换一种表达系统。
c。不完整的折叠。你应该使用一个融合伴侣和使用具有冷适应伴侣的菌株。低温与分子伴侣共表达。监测二硫键的形成，并允许在体外进一步折叠。
d. cDNA突变。你应该在诱导前后对质粒进行测序或使用recA−确保质粒稳定性。在每一轮表达式之前转化大肠杆菌。
问:我下订单后多久可以拿到产品?
我们的大部分蛋白质产品都有库存，一旦通过我们的质量控制流程，可以在3-7个工作日内发货。我们的每一种蛋白质在出厂前都经过严格的质量控制程序。
定制蛋白质服务大约需要1个月，点击这里了解五种重组表达系统。
问:你们的蛋白表达服务有哪些可交付的成果?
a.纯化的蛋白，纯度在85%以上。
b.标准COA报告及数据表，包括标签信息、分子量、电泳参数、蛋白表达量、浓度、纯度、SDS-PAGE等。
问:什么是送货方式?
蛋白质的默认输送形式是液体形式，默认存储缓冲液是tris为基础的缓冲液，pH=8.0, 50%甘油。如果您对缓冲器有特殊要求，请随时与我们联系。
虽然冻干形式会比液体形式更稳定，但一些蛋白质的结构和活性可能会被冻干过程破坏。通过添加保护剂和控制冻干条件来减少损伤。如客户对冻干产品有需求，请在订货时注明。
Q:我应该如何对产品进行重组和储存?
打开瓶盖前将试剂管离心。
短期储存或使用，请使用无菌去离子水将蛋白质完全重组至0.1-1.0 mg/mL。如需10-15分钟后取出，4℃保存。
对于长期保存，细胞因子或重组蛋白建议添加5-50%的甘油(终浓度)，在-20℃/-80℃下长期保存。我们默认的甘油最终浓度是50%。客户可以作为参考。
问:产品的保质期是多久?
货架期受贮藏状态、贮藏温度、缓冲成分和蛋白质本身稳定性等多种因素的影响。
在-20℃/-80℃条件下，液态蛋白的保质期一般为6个月左右，冻干型蛋白在-20℃/-80℃条件下的保质期一般为12个月。
